纳米羟基磷灰石/壳聚糖/海藻酸钠复合材料修复下颌骨缺损

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2013.51.006

中国组织工程研究 ›› 2013, Vol. 17 ›› Issue (51): 8815-8820.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.2013.51.006

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纳米羟基磷灰石/壳聚糖/海藻酸钠复合材料修复下颌骨缺损

孙璋¹，孟存芳²，张志全³，李善昌⁴，周洋¹

¹牡丹江医学院红旗医院口腔科，黑龙江省牡丹江市 157000；佳木斯大学附属第二医院口腔医院，²放射科，⁴颌面外科，黑龙江省佳木斯市 154004；³佳木斯市向阳区卫生局，黑龙江省佳木斯市 154002

出版日期:2013-12-17 发布日期:2013-12-17
通讯作者: 李善昌，副教授，硕士生导师，佳木斯大学附属第二医院口腔医院颌面外科，黑龙江省佳木斯市 154004 renyuanyuanjinan@126.com
作者简介:孙璋★，女，1986年生，山东省桓台县人，汉族，佳木斯大学在读硕士，主要从事口腔颌面外科专业研究。 443448890@qq.com

Nano-hydroxyapatite/chitosan/alginate for repairing mandibular defects

Sun Zhang¹, Meng Cun-fang², Zhang Zhi-quan³, Li Shan-chang⁴, Zhou Yang¹

¹ Department of Stomatology, Hongqi Hospital of Mudanjiang Medical University, Heilongjiang Province, China; ²Department of Radiology, Stomatological Hospital, Second Affiliated Hospital of Jiamusi University, Jiamusi 154004, Heilongjiang Province, China; ³Health Bureau of Xiangyang District, Jiamusi 154002, Heilongjiang Province, China;⁴ Department of Maxillofacial Surgery, Stomatological Hospital, Second Affiliated Hospital of Jiamusi University, Jiamusi 154004, Heilongjiang Province, China

Online:2013-12-17 Published:2013-12-17
Contact: Li Shan-chang, Associate professor, Master’s supervisor, Department of Maxillofacial Surgery, Stomatological Hospital, Second Affiliated Hospital of Jiamusi University, Jiamusi 154004, Heilongjiang Province, China renyuanyuanjinan@126.com
About author:Sun Zhang★, Studying for master’s degree, Department of Stomatology, Hongqi Hospital of Mudanjiang Medical University, Heilongjiang Province, China 443448890@qq.com

摘要/Abstract

摘要：

背景：有研究证实，纳米羟基磷灰石/壳聚糖/海藻酸钠三元复合材料具有一定的柔韧性和强度，具有与人体骨相似的生物活性。
目的：观察纳米羟基磷灰石/壳聚糖/海藻酸钠复合材料修复兔下颌骨缺损的效果。
方法：在18只健康新西兰大白兔两侧下颌骨制作10 mm×5 mm×5 mm的缺损，随机分为2组，实验组双侧骨缺损处植入纳米羟基磷灰石/壳聚糖/海藻酸钠复合材料，对照组双侧骨缺损处植入纳米羟基磷灰石/壳聚糖，植入后4，8，12周，应用锥形束CT观察各组缺损区材料降解、骨痂生长及骨连接情况，苏木精-伊红染色观察新骨生成。
结果与结论：两组骨密度灰度值均随着时间延长逐渐增加，组内不同时间点间差异有非常显著性意义(P < 0.01)；在相同时间点条件下，实验组大体观察、锥形束CT观察及CT灰度值，以及组织学观察均优于对照组(P < 0.05)。在材料植入后第4-8周，两组植入材料均已逐渐降解，缺损区与骨组织相交接处模糊，有少量新骨生成，与受体骨组织结合紧密，其中以实验组较为明显；第8-12周，两组植入材料已经基本降解完全，与受体骨组织开始逐渐相融合，有新生骨组织进一步生成，骨缺损区域逐渐被修复，以实验组较为明显。结果表明纳米羟基磷灰石/壳聚糖/海藻酸钠可有效修复骨缺损，促进新骨生成。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程

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关键词: 生物材料, 纳米生物材料, 组织工程骨材料, 纳米羟基磷灰石, 壳聚糖, 海藻酸钠, 骨缺损, 灰度值

Abstract:

BACKGROUND: Studies have confirmed that the nano-hydroxyapatite/chitosan/alginate composite materials have a certain flexibility and strength and possess a bioactivity similar to human bone.
OBJECTIVE: To explore the effect of the nano-hydroxyapatite/chitosan/alginate composite materials on the repair of rabbit mandible defects.
METHODS: Bilateral mandibular defect models of 10 mm × 5 mm × 5 mm were made in 18 healthy New Zealand white rabbits. Then, the rabbits were divided into two groups: experimental group was implanted with nano-hydroxyapatite/chitosan/alginate composite material, and control group was implanted with hydroxyapatite/chitosan composite. At 4, 8 and 12 weeks after implantation, cone-beam CT was applied to observe implant degradation, callus growth and bone connection in the defect area; new bone formation was observed by hematoxylin-eosin staining.
RESULTS AND CONCLUSION: The gray values of the bone density in the experimental group and control group gradually increased with time, and there were remarkably significant differences between the two groups at different time points (P < 0.01). At the same time point, the experimental group was superior to the control group in gross observation, cone-beam CT observation, gray value of CT and histological observation (P < 0.05). At 4-8 weeks after implantation, the implant materials in the two groups were gradually degraded with a blurred junction between the defect and bone tissue, and a small amount of new bone formed tightly integrated to the recipient bone tissue, in which the experimental group was more significant. And during 8 to 12 weeks, the degradation of implanted materials in the two groups was basically complete, and the implant began to merge with the recipient bone tissue, with further generation of new bone tissue and gradual repair of bone defect area, in which, the experimental group was more obvious. Results show that the nano-hydroxyapatite/chitosan/alginate can repair bone defects effectively, and promote the new bone formation.

中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程

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Key words: biocompatible materials, chitosan, hydroxyapatites, nanocomposites

中图分类号:

R318

孙璋，孟存芳，张志全，李善昌，周洋. 纳米羟基磷灰石/壳聚糖/海藻酸钠复合材料修复下颌骨缺损[J]. 中国组织工程研究, 2013, 17(51): 8815-8820.

Sun Zhang, Meng Cun-fang, Zhang Zhi-quan, Li Shan-chang, Zhou Yang. Nano-hydroxyapatite/chitosan/alginate for repairing mandibular defects[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2013, 17(51): 8815-8820.

图/表（结果） 4

2.1 实验动物数量分析 两组动物术后3 d均恢复良好，进食、尿便及活动正常，切口略有发红，对位良好。术后1周，切口无炎症反应，愈合良好，18只兔均进入结果分析。

2.2 各组大体观察结果

植入后4 周：实验组缺损区肌肉组织无明显肿胀，植入的纳米羟基磷灰石/壳聚糖/海藻酸钠复合材料减少，骨痂长入材料周围，但其硬度较低；对照组缺损区肌肉组织无肿胀，颜色正常，植入的纳米羟基磷灰石/壳聚糖复合材料减少，新生成骨痂量较少。

植入后8周：实验组缺损区所有植入的纳米羟基磷灰石/壳聚糖/海藻酸钠复合材料已基本吸收，缺损处被大量新生骨痂充填，新生骨痂强度较正常骨组织低，且颜色稍红；对照组缺损区中央仍有极少量纳米羟基磷灰石/壳聚糖复合材料，大量新生骨痂包围在缺损区，强度低于实验组。

植入后12周：实验组缺损区骨痂表面较为平整，与周围正常骨组织衔接良好且不易分辨，颜色也基本正常，但新生骨痂的强度较周围正常骨组织稍低；对照组纳米羟基磷灰石/壳聚糖复合材料已被吸收完全，被新生骨痂代替，骨痂表面较平整。

2.3 各组锥形束CT观察及CT值测量 应用锥形束CT扫描实验区三维立体形态，即进行横断面、冠状面和矢状面3部分扫描。实验组植入第4周时材料明显吸收，表面有大量骨痂覆盖，材料边缘略模糊，只有缺损边缘有阴影；第8周材料基本降解完全，骨缺损区边缘较模糊，新骨生长并填充满缺损处，密度较正常骨组织略高；第12周，骨缺损区边缘模糊，不易分辨，新骨形成且密度基本与正常组织一致，见图1。

对照组植入第4周时材料吸收，表面有骨痂覆盖，骨缺损与材料边界略模糊，缺损边缘仍有未结合；第8周时，材料基本降解完全，缺损区新生骨生长密度增高，边缘较模糊不完整；第12周，材料降解完全，缺损边缘基本模糊不清，新生骨密度较高，骨缺损得到基本修复。

同时测量植入4，8，12 周末两组骨质密度灰度值，CT灰度值可作为衡量骨密度幅度的指标，而骨密度值可以作为衡量骨骼情况的辅助指标，其灰度值越高，亮度越高，即骨密度越大^[15]，结果显示：在同一时间点，实验组CT值明显高于对照组(P < 0.05)；实验组组内不同时间点间比较差异有显著性意义(F=15.398，P=0.001)，对照组组内不同时间点间比较差异有显著性意义(F=16.882，P=0.001)，结果均为12周>8周>4周；实验组骨缺损修复效果优于对照组，见表1。

2.4 各组组织学观察结果 实验组植入第4周时材料明显吸收，表面有大量骨痂覆盖，材料边缘略模糊，只有缺损边缘有阴影；第8周材料基本降解完全，骨缺损区边缘较模糊，新骨生长并填充满缺损处，密度较正常骨组织略高；第12周，骨缺损区边缘模糊，不易分辨，新骨形成且密度基本与正常组织一致，见图2。

对照组植入第4周时材料吸收，表面有骨痂覆盖，骨缺损与材料边界略模糊，仍有未结合之处；第8周时，材料基本降解完全，缺损区新生骨生长密度增高，边缘较模糊，不完整；第12周，材料降解完全，缺损边缘基本模糊不清，新生骨密度较高，骨缺损基本修复，见图3。

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引言

近年来的随着车祸、外伤等事故的频发，决定了骨修复和骨代替材料逐渐成为医疗体系研究中的重点。传统的骨缺损修复多选用自体骨移植及异体骨移植方法。自体骨移植因具有良好的生物相容性、骨诱导性、骨成骨性，故被认为是理想的骨移植物，但其因增加了患者的疼痛、创伤，并且取骨量有限等原因限制了它的应用。异体骨移植因具有良好的的骨传导性，并且在使用某些特定处理方法后可以保留其骨诱导性，但存在异体骨移植后的排斥反应及感染等并发症。通过使用各种方法制备的异体骨可将宿主的免疫反应和传染概率降到最小，但同时也几乎灭活了所有细胞而使其失去成骨活性。因此，近年来寻找同时具有生物活性、可控生物降解性和适当力学性能的新型骨修复材料是生物材料领域的一项重大课题。
理想的骨修复材料应当满足以下标准^[1-2] ：具有生物相容性，材料无毒、无致癌、致畸性，对人体无不良反应；具有一定的骨传导性和骨诱导性；具有作为骨生长的模板，可形成互相连通的多级孔型结构，给予新生长细胞、新生血管和运输营养物质所需的空间；具有降解吸收速率与骨生长速率相互协调性；具有可降解性，代谢产物无毒，可被安全吸收；具有足够的机械性能，可经受人体骨骼运动所需的力学性能；具有防止软组织长入移植物与骨组织界面之间的性能；具有可塑性及易加工型，可以根据骨缺损部位的形状塑造各种几何形状；具有可灭菌性，使其满足临床使用时所需的法规要求。
自从19世纪70年代末以来，羟基磷灰石作为新型生物材料问世后，便立即引起了材料科学和医学界的广泛兴趣。同人体正常骨的磷灰石结晶极为相似的人工合成羟基磷灰石，己被动物实验及临床研究证实具有无毒性、良好的生物活性、生物相容性、一定的骨传导性和化学性质稳定等特点^[3] ，在植入人体后可在短时间内就与人体软硬组织形成紧密结合，并且为新骨再生提供优良的支架结构，是一种理想的骨缺损修复替代材料，故其作为骨修复替代材料在国内外被广泛应用。有实验发现羟基磷灰石颗粒越小，骨植入体的扭转模量、拉伸模量和拉伸强度就越高，疲劳抗力也相应提高，合成的纳米级羟基磷灰石将有利于改善骨植入体力学性能，克服其脆性大，抗压、抗折强度低，不能承重的缺点^[4] 。因而具有小尺寸效应及量子效应等优点的纳米级羟基磷灰石在生物医学中应用广泛^[5-7] 。
壳聚糖/纳米羟基磷灰石复合材料采用无机物和有机物的结合，基本模拟了人体骨的组织结构^[8] 。近年来，纳米羟基磷灰石/壳聚糖复合材料被广泛应用于骨缺损修复研究中，但仍存在纳米羟基磷灰石与壳聚糖界面结合不太理想、粒子分散不均匀、结晶度高、脆性大、力学性能差等问题^[9-10] 。海藻酸钠是一种带负电荷密度很高的聚电解质多糖，无毒，具有良好的生物降解性和生物相容性、易溶于水等性能，能与纳米羟基磷灰石、壳聚糖发生作用，使相间的界面结合更加牢固，改善材料性能^[11-12] 。吴芳等^[13]采用共沉淀法制备合成的纳米羟基磷灰石/壳聚糖-海藻酸钠三元复合材料中，纳米羟基磷灰石在有机相中分散均匀，可与有机相发生了相互作用，使界面结合牢固；复合材料中的纳米羟基磷灰石呈弱结晶状态，与人体骨相似，具有较高的生物活性；壳聚糖-海藻酸钠有机相对纳米羟基磷灰石材料起到增强增韧的作用，该复合材料有一定的柔韧性和强度，因此该材料有望成为一种理想的骨修复替代材料。

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材料方法

设计：随机对照动物实验。

时间及地点：于2012年7至12月在佳木斯大学完成。

材料：

实验动物：成年新西兰大白兔18只，雌雄各半，体质量2.5-3.2 kg，由佳木斯大学动物研究中心提供。

骨修复支架材料：纳米羟基磷灰石/壳聚糖/海藻酸钠及纳米羟基磷灰石/壳聚糖均由佳木斯大学材料科学与工程学院提供，其中纳米羟基磷灰石与壳聚糖的质量比为7/3，纳米羟基磷灰石与壳聚糖-海藻酸钠的质量比亦为7/3，壳聚糖与海藻酸钠的质量比为5/1。

实验方法：

实验动物分组：将18只新西兰大白兔随机分为两组，实验组骨缺损处植入纳米羟基磷灰石/壳聚糖/海藻酸钠复合材料；对照组骨缺损处植入纳米羟基磷灰石/壳聚糖复合材料。分别于支架植入后4，8，12周处死动物，每组每次3只。

兔下颌骨缺损实验模型的建立：以3%戊巴比妥 30 mg/kg沿新西兰大白兔耳缘静脉注射至完全麻醉，备皮消毒，在兔颏下左右两侧，沿下颌骨下缘切开4 cm皮肤，逐层分离肌肉、黏膜，沿下颌缘切开骨膜分离骨膜暴露下颌体，以低速牙钻生理盐水冷却下做一10 mm× 5 mm×5 mm的人工骨缺损，保留骨膜，生理盐水反复冲洗。两组在骨缺损区分别放入纳米羟基磷灰石/壳聚糖/海藻酸钠复合材料与纳米羟基磷灰石/壳聚糖后，生理盐水反复冲洗，并分层缝合。术后肌注庆大霉素40×10⁴U预防感染，1次/d，连续3 d。术后观察其精神状况，饮食、尿便是否正常，创口是否红肿及炎性渗出。

锥形束CT检测兔下颌骨骨缺损的愈合：于植入后4，8，12周，将实验大白兔处死后分离下颌骨，以缺损区的中央为中心点，应用锥形束CT对下颌骨缺损区域进行三维扫描，观察各组动物缺损区的材料降解、骨痂生长及骨连接状况，并比较各组缺损区的纵断面扫描截图^[14]。

组织学检查：于植入后4，8，12周处死动物，取材，经体积分数10%甲醛固定24 h，EDTA脱钙处理，石蜡包埋切片，苏木精-伊红染色，显微镜观察新骨生成情况。

主要观察指标：植入后4，8，12周，应用锥形束CT观察各组缺损区材料降解、骨痂生长及骨连接情况，苏木精-伊红染色观察新骨生成。

统计学分析：采用SPSS19.0统计软件包对CT骨密度灰度值进行统计分析，计量资料以x(_)±s表示，相同时间点两组之间的比较采用两独立样本t 检验，同组不同时间点之间的比较采用完全随机设计单因素方差分析(One-way ANOVA)，a=0.05为统计学检验水准。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程

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讨论

目前常用的骨组织工程材料种类很多，如羟基磷灰石、磷酸三钙等生物陶瓷类等，具备理想骨组织工程支架材料应具备的组织相容性和表面活性，骨传导性，生物可降解性，孔径和孔隙率等；但其缺乏可塑性和骨诱导性，体内成骨速度较慢，体内吸收速度亦较慢，脆性较大等缺点影响了其临床使用^[16] 。因此制备同时具有适宜机械强度、在体内较好降解速度和较快成骨速度的生物材料是目前研究的重点。对照组复合材料具有良好的生物活性、生物相容性、骨诱导性及降解速率，可是该复合材料仍存在着纳米羟基磷灰石与壳聚糖界面结合不太理想，纳米羟基磷灰石与壳聚糖粒子分散不均匀、结晶度高、复合材料脆性大、力学性能较差等问题^[7-8] 。为了更加完善材料的性能，人们把目光投向了三相复合物并开展了一些研究^[17] 。
海藻酸钠为褐藻的细胞膜组成成分，一般以钙盐或镁盐存在。海藻酸钠的化学组成为1，4-糖普键连接的β-D-甘露糖醛酸和α-L-古罗糖醛酸结合的线性链状阴离子聚合物[^18] 。有学者选择海藻酸钠进行可注射性组织工程骨研究，研究表明海藻酸钠为骨髓基质成骨细胞和软骨细胞提供了良好的三维生长环境，骨细胞生长良好，亦有骨髓腔样结构形成，并且可注射海藻酸钠支架材料同时兼备良好的可塑性及组织相容性，支架材料注射后局部无炎症反应，并且能够保持软骨细胞和骨细胞的生长和功能分化，在软骨和骨形成后逐渐被降解吸收^[19-21] 。
因此实验将目光放在了以纳米羟基磷灰石/壳聚糖为基础的纳米羟基磷灰石/壳聚糖/海藻酸钠这种三元复合支架材料上来提高材料的性能^[22-23] 。海藻酸钠的分子链上有大量羧基，壳聚糖的分子链上有大量伯氨基，两者之间可通过正、负电荷互相吸引聚合，形成离子交联网状结构，对纳米羟基磷灰石材料起到增强增韧的作用。纳米羟基磷灰石中的Ca ²⁺键能与有机相中的羟基结合，不仅增加了无机相和有机相之间的结合力，也使纳米粒子能更稳定的存在于有机相中，并且降低了纳米羟基磷灰石的结晶度，与人体骨的组成更加接近，具备了较高生物活性。何虹^[24] 、潘绵立等^[25]用海藻酸钙修复兔胫骨缺损取得成功，说明其具有良好的成骨性。而较海藻酸钙水溶性更佳的海藻酸钠的加入更可提高材料的亲水性。实验将纳米羟基磷灰石、壳聚糖同海藻酸钠相结合，使其互补，增加成骨性能。
实验结果显示，同时间段的实验组大体观察、锥形束CT观察及CT灰度值测定，以及组织学观察均优于对照组。在材料植入后第4-8周，两组植入材料均已逐渐降解，缺损区与骨组织相交接处模糊，有少量新骨生成，与受体骨组织结合紧密，其中以实验组较为明显。第8-12周，两组植入材料已基本降解完全，并与受体骨组织开始逐渐融合，有新生骨组织进一步生成，骨缺损区域逐渐被修复，以实验组较为明显。X射线影像是骨缺损最常用的检查方法，可直观反映骨缺损的恢复情况。在材料植入后第4-8周时，两组材料与受体骨组织边界逐渐从清晰到模糊，表面有骨痂生成并有少量新骨生成，材料体积变小，尤以实验组较为明显。在8-12周时，实验组材料吸收完全，新生骨组织充满缺损区，且新生骨密度基本与正常骨组织一致；对照组材料基本吸收完全，材料逐渐与受体骨良好统一，密度基本接近，骨缺损区基本修复，与大体观察结果相一致。纳米羟基磷灰石/壳聚糖/海藻酸钠复合支架材料的成骨性明显优于纳米羟基磷灰石/壳聚糖复合支架材料。组织学苏木精-伊红染色结果显示，纳米羟基磷灰石/壳聚糖/海藻酸钠复合材料在体内有较强的成骨能力，植入受体内后各时间段的新骨生成量均高于对照组；植入第12周时骨单位的排列和结构已接近较为成熟的板层骨，而纳米羟基磷灰石/壳聚糖复合材料组在骨小梁中间还有较多的类骨质，但成骨细胞较多。同时实验结果表明：纳米羟基磷灰石/壳聚糖/海藻酸钠复合材料在第8周时已基本吸收完全，在第12周时已吸收完全；而纳米羟基磷灰石/壳聚糖复合材料组有少量标本至第8周时未吸收完全，故纳米羟基磷灰石/壳聚糖/海藻酸钠复合材料在体内具有更好的降解性。因此，根据锥形束CT及组织学苏木精-伊红染色显示，纳米羟基磷灰石/壳聚糖/海藻酸钠材料的骨缺损修复效果明显优于纳米羟基磷灰石/壳聚糖材料。
实验发现纳米羟基磷灰石/壳聚糖复合材料植入兔骨缺损区后表现出了良好的生物相容性、生物活性、骨传导性及可降解性，是一种良好的骨缺损替代植入材料。同时纳米羟基磷灰石/壳聚糖/海藻酸钠复合支架材料，植入兔下颌骨骨缺损区后也表现出良好的无毒性、生物相容性、生物活性、降解性及骨传导性，相较于纳米羟基磷灰石/壳聚糖表现出更为优良的生物相容性、可降解性及骨传导性等。究其原因：①在海藻酸钠的分子链上有大量羧基键，而壳聚糖的分子链上有大量伯氨基键，聚阴离子海藻酸钠可在静电作用下与壳聚糖分子链中大量存在伯氨基作用，对纳米羟基磷灰石材料起到增强增韧的作用。②纳米羟基磷灰石中的Ca²⁺能与有机相中的羟基键合，不仅增加了有机相和无机相之间的结合力，使得纳米粒子在有机相中更稳定的存在，而且降低了纳米羟基磷灰石的结晶度，形成更为接近人体骨的结构，具备较高的生物活性。③海藻酸钠微溶于水的特性，使其在加入纳米羟基磷灰石/壳聚糖复合材料后可提高该复合材料的亲水性。④壳聚糖与海藻酸钠具有易降解性，在降解后可提高孔隙率较小复合材料的孔隙率。对于骨组织工程材料而言，合适的孔径既有利于营养物质的传递及代谢废物的排泄，又可促进新骨组织的长入。
赵宏霞等^[26]研究得出纳米羟基磷灰石/壳聚糖-庆大霉素缓释材料具有良好的抑菌效果及缓释规律，可作为有效治疗骨髓炎的一种局部药物缓释剂。抗生素庆大霉素的负载不仅使纳米羟基磷灰石/壳聚糖材料获得了良好的抑菌效果，也使得复合材料的机械强度显著提高，因此纳米羟基磷灰石/壳聚糖在骨缺损修复及骨髓炎的防治中显示出了极大的临床应用潜能，这为纳米羟基磷灰石/壳聚糖-海藻酸钠复合材料包裹抗生素的实验提供了一定依据，为进一步完善纳米羟基磷灰石/壳聚糖/海藻酸钠复合材料的性能提供了基础。颜秋平等^[27] 、陈云等^[28]实验表明，海藻酸钠可作为药物载体，但其对pH值较为敏感，如果该问题得到有效解决的话，在接下来的临床工作中将其应用到治疗因感染、肿瘤等造成的大面积骨缺损，不仅可作为修复骨缺损的填充替代材料，并且可起到局部释放药物作用，减少全身用药带来的不良反应，此应用必将具有较好的应用前景，但其载药及缓释作用尚有待进一步的实验来验证。
综上所述，纳米羟基磷灰石/壳聚糖/海藻酸钠复合材料在植入骨缺损区后表现出了较为理想的生物活性、生物相容性、骨传导性及可降解性，并且与纳米羟基磷灰石/壳聚糖复合材料相比具有更为良好的生物相容性及成骨活性，具有修复效果理想、经济等优点。虽然如此，仍存在些问题有待解决和得到认证，如在苏木精-伊红染色的脱水切割过程中，部分标本的材料与骨结合面出现空隙甚至分离，染色片出现褶皱等情况，还需得到进一步的解决。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程
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纳米羟基磷灰石/壳聚糖/海藻酸钠复合材料修复下颌骨缺损

Nano-hydroxyapatite/chitosan/alginate for repairing mandibular defects

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